1. Физико-химические основы тонкослойной хроматографии
2. Основы флуоресценции. Понятие зонда и метки. Требования к флуоресцирующему хромофору
Список использованных источников
1. Физико-химические основы тонкослойной хроматографии.
Хроматографией называют динамический метод разделения и определения веществ, который основан на многократном распределении компонентов между двумя фазами – подвижной и неподвижной.
В качестве подвижной фазы может выступать жидкость или газ, которые протекают под давлением через слой неподвижной фазы.
Неподвижная фаза (сорбент) – это твердое пористое вещество с развитой поверхностью или пленку жидкости, которая нанесена на поверхность твердого инертного носителя.
Разделение при хроматографировании начинается тогда, когда вещество поступает в слой сорбента вместе с потоком подвижной фазы. При этом происходит сорбирование вещества, а после при контакте со свежими порциями подвижной фазы десорбируется. Перемещение подвижной фазы осуществляется непрерывно, в связи с чем непрерывно происходит сорбция и десорбция вещества. При этом часть вещества находится в неподвижной фазе в сорбированном состоянии, а часть – в подвижной фазе и перемещается вместе с ней. В результате скорость движения вещества оказывается меньше, в сравнении со скоростью движения подвижной фазы. Чем сильнее сорбируется вещество, тем медленнее оно перемещается.
2. Основы флуоресценции. Понятие зонда и метки. Требования к флуоресцирующему хромофору.
Флуоресценцией называют физический внутримолекулярный процесс, в результате которого молекула за время, составляющее 10-8–10-9 с, переходит в основное состояние с испусканием при этом кванта света. Как и при поглощении, в данном случае происходит реализация принципа Франка–Кондона. В связи с тем, что в сравнении с поглощением испускание света происходит в течение более длительного времени, для структуры биомолекул за этот период характерен ряд изменений. Данными структурными перестройками оказывается влияние на параметры флуоресценции системы, позволяющие получить информацию об ее электронно-возбужденных состояниях.
Полная энергия состояния молекулы Е представлена суммой энергий электронного возбуждения Ее, колебательной энергии Ev и вращательной энергии Er . Соответственно, в случае поглощения кванта света полное изменение энергии молекулы можно представить следующим образом:
hυ = ∆ Ее + ∆ Ev + ∆ Er , при этом Ее>> Ev> Er .
1. Вергун, О.М. Хроматографические методы анализа: практикум для студентов фармацевтического факультета / О. М. Вергун, Н. Д. Яранцева. – Минск: БГМУ, 2018. – 30 с.
2. Конюхов, В.Ю. Методы исследования материалов и процессов / В. Ю. Конюхов, И. А. Гоголадзе, З. В. Мурга. – 2-е изд., испр. и доп. – Москва: Издательство Юрайт, 2018. – 226 с.
3. Тонкослойная хроматография. Теоретические основы и практическое применение / Е.Г. Сумина [и др.] . – Саратов: СГУ им. Н.Г. Чернышевского, 2012. – 128 с.
4. Шейко, Л. М. Практикум по медицинской и биологической физике. Раздел «Биологическая физика»: Методы биофизических исследований / Л. М. Шейко, С. Б. Бокуть. – Минск: МГЭУ им. А. Д. Сахарова, 2011. – 64 с.
5. Лакович, Дж. Основы флуоресцентной спектроскопии / Дж. Лакович, Пер. с англ. – М.: Мир, 1986. – 496 с.
6. Баранов, А.П. Медицинская и биологическая физика: Учебное пособие для студентов лечебно-профилактического факультета медицинского вуза. (2-е издание) / А.П. Баранов, М.Ф. Клименок. – Витебск, ВГМУ, 2010. – 392 с.
