1. Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ). Ион-парная хроматография
2. Общая теория флуоресценции. Эксимеры
Список использованных источников
1. Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ). Ион-парная хроматография
В высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) природа процессов, происходящих в хроматографической колонке, обычно идентична процессам в газовой хроматографии. Единственная разница заключается в использовании жидкости в качестве стационарной фазы. Из-за высокой плотности жидких подвижных фаз и высокого сопротивления колонок газовая и жидкостная хроматография сильно различаются по конструкции оборудования.
В ВЭЖХ чистые растворители или их смеси обычно используются в качестве подвижных фаз.
Для создания потока чистого растворителя (или смесей растворителей), называемого элюентом в жидкостной хроматографии, используются насосы, которые включены в гидравлическую систему хроматографа.
Адсорбционная хроматография проводится в результате взаимодействия вещества с адсорбентами, такими как силикагель или оксид алюминия, имеющих активные центры на поверхности. Различие в способности взаимодействовать с адсорбционными центрами разных молекул образца приводит к их разделению на зоны при движении с подвижной фазой вдоль колонки. Разделение зон компонентов, достигаемое в этом случае, зависит от взаимодействия как с растворителем, так и с адсорбентом.
Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) используется для обнаружения полярных нелетучих веществ, которые по некоторым причинам не могут быть преобразованы в форму, подходящую для газовой хроматографии, даже в форме производных. Такие вещества, в частности, включают сульфоновые кислоты, водорастворимые красители и некоторые пестициды, например производные фенилмочевины.
2. Общая теория флуоресценции. Эксимеры
Флуоресценция – излучательный переход, сопровождающийся переходом молекулы из состояния S1 в S0.
Спектры флуоресценции еще более зависят от окружающей среды, чем спектры поглощения. Надежная регистрация параметров флуоресценции требует меньше материала.
Измеряя флуоресценцию, можно получить информацию о конформации макромолекул, сайтах связывания, взаимодействиях с растворителем, степени гибкости, межмолекулярных расстояниях и коэффициенте вращательной диффузии макромолекул. Кроме того, флуоресценция может использоваться для локализации в живых клетках тех веществ, которые не могут быть обнаружены другими методами.
Теория флуоресценции, как и другие физические методы, до сих пор не всегда допускает однозначную корреляцию между характеристиками флуоресценции и свойствами непосредственного окружения излучателя. Поэтому на этот раз возможность применения метода определяется эмпирическими правилами, полученными при исследовании модельных соединений.
Энергия света поглощается только тогда, когда молекула переходит с нижнего на верхний энергетический уровень. Если молекула поглощает больше энергии, чем необходимо для достижения первого возбужденного состояния S1, то избыток энергии может возбуждать колебания молекулярного скелета, и молекула будет находиться на одном из колебательных уровней. Эта колебательная энергия быстро рассеивается в виде тепла при столкновении с молекулами растворителя, и молекула падает до самого низкого уровня возбуждения S1. Возбужденная молекула затем возвращается на уровень S0 с излучением света (флуоресценцией) или безызлучательным переходом. Поскольку энергия теряется во время перехода к самому низкому уровню S1, излучаемый свет имеет меньше энергии (то есть с большей длиной волны), чем поглощенный свет. Однако, возвращаясь к уровню S0, молекула вместо «абсолютного» основного состояния может попасть на один из колебательных уровней S0. Эта вибрационная энергия также будет рассеиваться в виде тепла.
1. Пилипенко А.Т. Аналитическая химия. В двух книгах: кн..1 / А.Т. Пилипенко, И.В. Пятницкий. – М.: Химия, 1990, – 480 с.
Пилипенко А.Т. Аналитическая химия. В двух книгах: кн..2 / А.Т. Пилипенко, И.В. Пятницкий. – М.: Химия, 1990, – 480 с.
2. Петрухин О.М. Физические и физико-химические методы анализа: Учебное пособие для химико-технологических специальностей вузов. - М.: Высш. шк., 1993. - 496 с.
3. B. Valeur «Molecular fluorescence. Principles and application» // B. Valeur. Wiley-VCH. 2001. – 381p.
4. Л.В. Левшин «Оптические методы исследования молекулярных систем. Ч.1. Молекулярная спектроскопия» // Л.В. Левшин, А.М. Салецкий. –Изд-во МГУ, Москва. 1994, – 320 с.
