Глава 1
1.1. Характеристика препаратов крови
1.2. Консервирующие растворы препаратов крови
1.3. Характеристика основных возбудителей, передаваемых от донора к реципиенту
1.4. Донорство в Беларуси и Брестской области
Глава 2 Материалы и методы
2.1. Система тестирования донорской крови на наличие вирусных агентов
2.2. Методы исследования
3 Результаты исследования и их обсуждение Анализ инфицированности доноров за 2011-2015 гг.
3.1. Анализ инфицированности доноров ВИЧ – инфекцией в период за 2011-2015 гг.
3.2. Анализ инфицированности доноров вирусом гепатита В в период за 2011-2015 гг.
3.3. Анализ инфицированности доноров вирусом гепатита С в период за 2011-2015 гг.
3.4. Анализ инфицированности доноров бледной трепонемой в период за 2011-2015 гг.
3.5. Структура инфицированности доноров в период за 2011-2015 гг.
Заключение
Список использованных источников
Введение
По медицинским показаниям донорская кровь и ее компоненты требуются во множестве случаев. Это различного объема кровопотери, анемии, аутоиммунные заболевания, патологии гемостаза и другие заболевания и состояния, широко и повсеместно распространенные среди населения. Поэтому и существуют кадровые доноры, регулярно сдающие кровь, либо безвозмездно, либо за денежную компенсацию. В СССР до 90% крови заготовлялось благодаря безвозмездным донорам. Кадровые доноры - золотой фонд любой национальной Службы крови, так как кровь требуется постоянно, а не только в дни катастроф.
Вместе с тем распространение СПИДа, вирусных гепатитов, а также рост наркомании в нашей стране заставили специалистов обратить пристальное внимание на инфекции, которые могут передаваться от донора к реципиенту. Повсеместные финансовые затруднения, снижение культурного и образовательного уровня вместе с сокращением кадрового донорства отчасти компенсировалось в Республике Беларусь и бывших странах СНГ ростом разового донорства. Сложности массового досконального обследования разовых доноров приводит к тому, что они могут представлять серьезную инфекционную угрозу здоровью тех, кому переливание крови и ее компонентов требуется по лечебным, а не по жизненным показаниям.
В структуре инфекционных заболеваний, передаваемых трансфузионным путем, вирусные инфекции составляют 80%, и это число неуклонно растет. Возможность развития манифестной формы заболевания зависит от дозы вируса и способности организма реципиента ему сопротивляться. Так как кровь переливается пациентам с уже имеющейся патологией, такая способность по определению ниже средней. В отношении вируса многое зависит от его вида. Так, для гепатита В, заражающая доза составляет 10-100 вирусных частиц, которые могут содержаться в 0.5 мкл крови носителя (и даже то, что останется после высыхания этого объема, сохранит инфекционность для человека, поскольку этот вирус чрезвычайно устойчив во внешней среде), а переливают обычно литровые объемы плазмы (1 л = 106 мкл)! Для большинства других вирусов инфицирующие дозы, как правило, выше. Особую опасность представляют «здоровые носители» вирусных и бактериальных инфекций.
Трансфузионный путь передачи вирусных и бактериальных инфекций не является ведущим, однако занимает центральное место в структуре заболеваемости. Так, по Европейским исследованиям 2014 г, 23,6 % ВИЧ – положительных детей инфицированы при переливании крови.
Вирусную безопасность препаратов обеспечивает вирусологический контроль плазмы крови, предназначенной для переработки, - входной контроль. Методически он повторяет процедуру выбраковки донорской крови. Но из экономических соображений образцы плазмы объединяют в пулы по нескольку десятков. При объединении возможно разведение вируса, что в свою очередь предъявляет повышенные требования к чувствительности методов.
Глава1
1.1. Характеристика препаратов крови
Как было сказано выше, основным источником крови являются доноры. В Республике Беларусь донорство добровольное: любой здоровый гражданин может стать донором.
Донорство крови и ее компонентов – добровольное участие доноров в охране здоровья граждан путем донации крови и ее компонентов для медицинских целей. Донорство включает комплекс мероприятий по медицинскому освидетельствованию донора, заготовке от него крови, выделению и хранению компонентов крови.
Состояние здоровья доноров определяют при обследовании. Обязательно проводят реакцию Вассермана на сифилис, исследование на носительство вирусов гепатита и СПИДа. В качестве источника крови доноры могут использоваться для прямого, т.е. непосредственно больному, переливания крови.
Процесс заготовки крови и ее компонентов включает:
- донацию крови – разовое извлечение крови, даваемой донором;
- донацию плазмы – разовое извлечение плазмы крови методом плазмафереза.
В зависимости от иммунных характеристик получаемой плазмы различают: изоиммунную плазму, содержащую в определенной концентрации специфические белковые структуры (изоиммунные антитела), используемую для производства препаратов крови и диагностических реагентов; иммунную плазму, содержащую в определенной концентрации специфические белковые структуры (иммунные антитела) естественного или искусственного происхождения, обладающие свойством целенаправленного лечебного взаимодействия на определенные виды возбудителей заболеваний. Иммунная плазма используется для переливания реципиенту или для производства препаратов крови.
- донацию клеток – разовое извлечение клеток крови донора методом цитафереза.[1,с. 241]
В процессе заготовки и переработки крови получают: компоненты крови – составные части крови, выделенные из нее в виде клеток и бесклеточных сред; препараты крови – лекарственные средства, полученные при переработке компонентов крови.
Отметим, что для переливания может быть использована утильная кровь, при этом первостепенное значение имеет плацентарная кровь. Ранее использовали кровь, полученную при кровопускании, применявшемся для лечения больных эклампсией, с гипертоническим кризом. Из утильной крови готовят препараты – протеин, тромбин, фибриноген и др. Плацентарную кровь собирают сразу же после рождения ребенка и перевязки пуповины. С соблюдением асептики втекающую из сосудов пуповины кровь собирают в
Глава 2 Материалы и методы
2.1. Система тестирования донорской крови на наличие вирусных агентов
Диагностика ВИЧ методом ИФА антител к ВИЧ 1 и ВИЧ 2 и антигена р24 к ВИЧ 1 при помощи системы реагентов «КомбиБест ВИЧ 1,2 АГ/АТ».
1. Назначение
1.1. Набор предназначен для одновременного выявления антигена р24 ВИЧ 1 и антител ВИЧ 1 и ВИЧ 2 в сыворотке (плазме) крови. Рекомендуется для первичной лабораторной диагностики ВИЧ – инфекции и обследования доноров крови, органов, тканей человека.
1.2. Набор рассчитан на проведение 192 анализа, включая контроли.
2. Характеристика набора
2.1. Принцип действия
Метод выявления основан на твердофазном иммуноферментном анализе
С применением рекомбинантных антигенов ВИЧ 1 и ВИЧ 2 и моноклональных антител к антигену р24 ВИЧ 1. При наличии в исследуемых образцах антител к ВИЧ 1 и ВИЧ 2 они связываются с рекомбинантными белками иммобилизированных на поверхности лунок планшета, к образовавшемуся комплексу во время второй инкубации присоединяется конъюгат рекомбинантных белков ВИЧ с пероксидазой хрена. При наличии в исследуемом образце антигена р24 ВИЧ 1 он в ходе первой инкубации связывается с моноклональными антителами к р24, иммобилизированными на поверхности лунок планшета и одновременно с биотинилированными поликлональными антителами к р24, существующими в растворе. В ходе второй инкубации к образовавшемуся комплексу присоединяется конъюгат стрептавидина с пероксидазой. Во время инкубации с раствором тетраметилбензидина происходит окрашивание раствора в лунках, содержащих образовавшиеся комплексы антиген – антитело. Интенсивность окраски прямо пропорционально концентрации антител. После измерения оптической плотности раствора в лунках на основании рассчитаного значения ОПкрит анализируемые образцы оцениваются как положительные или отрицательные.
3. Аналитические и диагностические характеристики
3.1. Результат качественного определения набором антител к ВИЧ 1 должен соответствовать требованиям СПП 05-2-380: чувствутельность к антителам ВИЧ 1 – 100%.
3.2.Результат качественного определения набором антител к ВИЧ 2 должен соответствовать требованиям СПП 05-2-380: чувствутельность к антителам ВИЧ 2 – 100%.
3.3. Минимальная концентрация антигена р24 ВИЧ 1, достоверно определяемая прибором, должна быть не выше 10 пг/мл.
3. Результаты исследования и их обсуждение
Анализ инфицированности доноров за 2011-2015 гг.
Был проведен анализ многолетней динамики инфицированности доноров за период 2011-2015 гг.
3.1. Анализ инфицированности доноров ВИЧ – инфекцией в период за 2011-2015 гг.
На протяжении данного периода показатели инфицированности населения колебались от 4 случаев в 2011 году до 0 случаев в 2014 году. Средний показатель заболеваемости составил 2 ±0,3. (рис.3.1.1.). Медиана равна 3, мода множественная (по одному значению заболеваемости). Характер диаграммы регрессирующий.
Анализ погодовых темпов прироста показал, что за изученный период наибольший прирост наблюдался в 2013 году (рис. 3.1.2.).
Заключение
Целью данной курсовой работы явился анализ результатов выявления маркеров вирусных инфекций при заготовке донорской крови.
Для реализации поставленной цели были определены задачи:
1). Изучить систему выявления маркеров вирусных инфекций при заготовке крови;
2). Проанализировать результаты выявления вирусных маркеров и их частоту при заготовке крови.
Для лабораторной диагностики возбудителей парентеральных инфекций использовался метод иммуноферментного анализа, лежащий в основе систем «КомбиБест ВИЧ 1,2 АГ/АТ», «Вектогеп В-НВs-антиген-подтверждающий тест», «ИФА-HCV-AT тест», «РекомбиБест антипалидум - суммарные антитела тест».
В качестве материала для статистического исследования использовались журналы регистрации положительных результатов на ВИЧ, ВГВ, ВГС, сифилис.
Для статистического исследования использовался пакет программ: Microsoft Excele; Statsoft Statistica 10.0; MedCalc, Microsoft Word. Построение таблиц и графиков проводилось в программе Microsoft Excele.
Проведен статистический анализ динамического ряда, определен абсолютный прирост, темп прироста, а также динамика изучаемого явления.
Проведена описательная статистика значений динамического ряда с определение среднего значения, моды, медианы, максимального и минимального значения.
При анализе многолетней динамики инфицированности доноров крови основными парентеральными инфекциями было выявлено, что в течение указанного периода времени наблюдается заметное снижение количества инфицированных доноров всеми рассматриваемыми возбудителями. Одно из центральных мест здесь, безусловно, занимает своевременная серологическая диагностика вирусных и бактериальных инфекций. Серологические массовые исследования лабораторных образцов дают возможность определить степень распространения зараженности основными парентеральными возбудителями, выявить доноров с латентной формой инфекции. Повсеместное распространение данных методов, широкое обеспечение станций переливания крови материалами для серологических исследований, разработка экспресс – методов диагностики (к которым также относится изучаемый в данной курсовой работе иммуноферментный анализ) позволило быстро и качественно обследовать всех доноров крови на различных этапах ее сдачи.
Как следствие, можем сделать основные выводы:
4. В связи с более жестким отбором доноров наблюдается снижение количества инфицированных доноров
1. Ажигирова, М.А., Вязова, Е.П. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1993 г., т. 115. – №4. – С. 364-366.
2. Ахсянов, У.У., Афонин Н.И. Гематология и трансфузиология. 1983 г., т.28 – С.41-44.
3. Вязова, Е.П., Ажигирова, М.А. Химико-фармацевтический журнал, 1989 г., т. 23. – №6. – С. 645-649.
4. Гласко, Е.Н., Логинова, Л.Н. Гематология и трансфузиология. 1983 г., т.28. – №4. – С. 49-50.
5. Иванов, К.П. Гематология и трансфузиология. 1989 г., т.34. – №1. – С. 42-47.
6. Иванов, К.П. Гематология и трансфузиология. 1992 г., т. 37. – №2. – С. 26-29.
7. Лобунец, К.А. Гематология и переливание крови, 1984г., вып. 19. – С. 70-72.
8. Матвиенко, В.П., Гусенова, Ф.М. Гематология и трансфузиология. 1983 г., т. 28. – №4. – С. 38-41.
9. Нартайлаков, М.А. Общая хирургия: учебное пособие/ М.А. Нартайлаков. – Ростов н/Д: Феникс, 2006. – 256 с.
10. Образцов, В.В., Гриманова, А.Ю. Биохимия. 1992 г., т. 57, вып. 7, С. 1011-1020.
11. Панченко, С.М., Адгонин, Н.И. Гематология и трансфузиология. 1988 г., т. 33. – №5. – С. 29-31.
12. Пропедевтика хирургии: учебное пособие/ ред. В.К. Гостищев, ред. А.И. Ковалёв. – 2-е изд., испр. и доп. – М.: МИА, 2008. – 904 с.
13. Савельев, О.Н., Зиновьев, Ю.В. Медицинский реферативный журнал. раздел 18, 1987 г. – №2. – С. 17-24.
14. Седова, А.А., Питовская, Н.Н. Медицинский реферативный журнал, раздел 18, 1987 г. – №5. – С. 34-38.
15. Селиванов, Е.А., Кочетопов, Н.И. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1991 г., т. 112. – №8. – С. 23-24
16. Смирнов, И.В., Хачатурьян, А.А. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1991 г., т. 112. – №11. – С. 500-501.
17. Смирнов, И.В., Хачатурьян, А.А. Гематология и трансфузиология. 1992 г., т.37. – №7-8. – С. 15-17.
18. Терешина, Е.В., Дорошина, Н.Н. Химико-фармацевтический журнал, 1990 г., т. 20. – №7. – С. 16-18.
19. Шабалин, В.Н., Кочетопов, Н.И. Гематология и трансфузиология. 1985 г., т.30. – №2. – С.3-4.
20. Герценштейн Г. М., Соколов А. м.,. Инфекционные болезни // Энциклопедический словарь Брокгауза и Ефрона : в 86 т. (82 т. и 4 доп.). — СПб., 1890—1907. – №2 С. 58-64; 275-278; 293-296.
